Кроме биологических методов определения активности антибиотиков, существуют различные химические и физико-химические методы.
Биологическая активность выражается в международных единицах. За международную единицу пенициллина (ME) принимают наименьшее количество препарата, подавляющего рост эталонного штамма стафилококка. Исходя из того, что в 1 мг чистого пенициллина содержится 1667 единиц, за 1 единицу препарата принимают антибактериальную активность, которой обладает 0,6 мкг стандартного бензилпенициллина. Активность других антибиотиков измеряется единицей, равной 1 мкг чистого сухого препарата.
В настоящее время распространен метод определения активности антибиотиков по весу препарата. Концентрация сухих препаратов и растворов выражается в количестве микрограммов активного вещества в 1 г препарата или в 1 мл раствора.